Kvorumni sezish inhibitörleri: CRISPR immun tizimiga asoslangan Pseudomonas aeruginosa fag qarshiligining rivojlanishiga hissa qo'shing.

Antimikrobiyal qarshilik klinik davolashda muhim muammo hisoblanadi va Pseudomonas aeruginosa operatsiyadan keyin fag virusi infektsiyasining potentsial maqsadi hisoblanadi. Laboratoriya tadqiqotlari shuni ko'rsatdiki, Pseudomonas aeruginosa bakteriofaglar va boshqa parazitar DNKlarning immun xotirasini hosil qilish, murakkab tabiiy muhitda tez rivojlanish va bakteriofagga chidamlilikni rivojlantirish uchun CRISPR-Cas moslashuvchan immun tizimining genlaridan foydalanadi va shu bilan fag terapiyasini qo'llashni cheklaydi. So'nggi tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, Quorum Sensing (QS) tizimi Pseudomonas aeruginosa ning CRISPR-Cas immun tizimining ifodasini tartibga soladi. Pseudomonas aeruginosa QS tizimi LasIR va RhlIRdan iborat bo'lib, ular CRISPR-Cas immun tizimi, virulentlik va biofilm kabi fiziologik funktsiyalarni ifodalashni tartibga sola oladi. LasIR 3-okso-C12-homoserin lakton (3OC12-HSL) signalizatsiya molekulasi, RhlIR C4-homoserin lakton (C4-HSL) signal molekulasi ifodasini tartibga soladi. Shu sababli, tadqiqotchilar tibbiy kvorumni sezish inhibitörlerinin (Quorum Sensing Inhibitors, QSI) ishlatilishi CRISPR immun lokuslariga asoslangan Pseudomonas aeruginosa evolyutsiyasini cheklashi va ularni klinik tadqiqotlarga qo'llashi mumkin deb taxmin qiladilar.

Ushbu tadqiqotda tadqiqotchilar Baicaleinni Pseudomonas aeruginosa CRISPR asosidagi fag (DMS3vir) qarshiligiga ta'sirini o'rganish uchun QSI sifatida ishlatgan. Shu bilan birga, Pseudomonas aeruginosa QS gen mutant shtammi 3OC12-HSL va C4-HSL ishlab chiqara olmaydigan qilib qurilgan. 3OC12-HSL va C4-HSL ni qo'shib, CRISPR-Cas immun tizimiga asoslangan Pseudomonas aeruginosa fagga qarshilik evolyutsiyasi tahlil qilindi. Pseudomonas aeruginosa fagining adsorbsiyasi va tozalash qobiliyatini o'rganish mexanizmi. Bundan tashqari, QS tizimi bloklanganidan keyin Pseudomonas aeruginosa fag bilan raqobatlashish qobiliyatidagi o'zgarishlarni o'rganish uchun fagga sezgir bakteriyalar (CRISPR-KO) va fagga chidamli bakteriyalar (CRISPR-KO sirt mutantlari) ishlatilgan.

Nazorat guruhida fag zichligi oshgani sayin, Pseudomonas aeruginosa ning yovvoyi turdagi fag qarshiligi pasaygan. Biroq, QSI Pseudomonas aeruginosa qarshiligini kamaytirishi kutilgan natijadan farqli o'laroq, 100 mM baikalein qo'shilganda, Pseudomonas aeruginosa ning fagga qarshiligi oshdi. Fagga sezgir bakteriyalar 104pfu yoki 107pfu fagni yuqtirganda, ularning qarshiligi sezilarli darajada oshadi. Bundan tashqari, tadqiqot natijalari shuni ko'rsatadiki, Pseudomonas aeruginosa QS tizimi inhibe qilinganida, fagning uy egasiga yuqishi qiyin bo'ladi. QS tizimi inhibe qilinganida, 106 pfu -fag muhitida Pseudomonas aeruginosa nisbiy yaroqliligi sezilarli darajada oshdi. Ushbu tadqiqotda QSI IV turdagi fimbriyalarning ifoda etilishiga ta'sir ko'rsatdi, bu bakteriyalar kulturasining kech lizisiga olib keldi, fagning adsorbtsiya tezligini pasaytirdi va bakterial CRISPR immun tizimida fagga qarshilik evolyutsiyasini osonlashtirdi. Shuning uchun, QSI yuqumli pili tipidagi fagning Pseudomonas aeruginosa ga xos terapevtik ta'sirini kamaytiradi.